分子互作与检测
Detection
微量热泳动(MST)实验

微量热泳动(MST)实验

微量热泳动(MST)是一种简单、快速、精确定量生物分子相互作用的方法。它可以测量分子在微观温度梯度场中的运动,以及检测分子水化层、电荷和大小的改变,从而定量检测生物分子间的相互作用。当进行MST实验的时候,样品由红外激光加热产生一个微观的温度梯度场,再通过共价结合的荧光染料来监测和定量分子的定向运动。应用范围包括小分子的结合行为,蛋白与蛋白之间的相互作用以及蛋白复合体之间的相互作用等。.

 

微量热泳动(MST)工作原理:将波长为 1480 nm 的红外激光照射于荧光激发光路上,通过分色镜照射到毛细管中的样品,样品中的水分子吸收红外光发热而形成温度梯度。MST 仪器通过记录激光器打开前、打开期间和打开后处于温度梯度中的样品内部红外激光照射区域的荧光变化情况,从而实现较短时间的测定。

微量热泳动(MST)实验应用范围

  (1)蛋白与蛋白相互作用

  (2)蛋白与小分子相互作用

  (3-肽相互作用

  (4)蛋白核酸相互作用

  (5)核酸适配子小分子相互作用

 

微量热泳动(MST)实验特点:

1.实验操作简单,实验过程快速,实验和数据分析可以在20分钟内完成;

2.样品缓冲液要求不高,细胞裂解液也可进行检测;

3.样品无需固定在芯片或者传感器上,仅需要进行荧光标记,就可以在天然环境下检测;

4.适用范围广,分子量最小可以到离子级别,亲和力的测定范围从pMmM级别;

5.样品通量很高,每次可以运行16个浓度的样品,样品消耗量很小

 

 

 

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